利用细菌转座子构建适于家蚕的Bac-to-Bac快速基因表达系统

编号 zgly0001312893

文献类型 期刊论文

文献题名 利用细菌转座子构建适于家蚕的Bac-to-Bac快速基因表达系统

作者 吴小锋  曹翠平  鲁兴萌 

作者单位 浙江大学动物科学学院  浙江大学动物科学学院 杭州310029  杭州310029 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2006年02期

年份 2006 

分类号 Q78 

关键词 家蚕  杆状病毒  细菌转座子  表达系统 

文摘内容 为了较好地解决家蚕杆状病毒基因表达系统(BmNPV expression system)在重组病毒构建和纯化过程中存在的重组率低、空斑分析技术繁琐、花费时间长等缺点,借鉴国外AcNPV Bac-to-Bac快速基因表达系统工作原理,对家蚕BmNPV基因组进行了改造。通过同源重组的方法,将含有单拷贝数细菌F复制子、插入有细菌转座子整合靶位点、编码LacZα肽的部分DNA片段和抗性选择标记基因的基因片段重组入家蚕BmNPV基因组,替换多角体蛋白基因,获得了家蚕BmNPV病毒穿梭载体BmBacm id;并利用供体质粒上的表达盒和细菌转座子以及细菌转座子的基因定位转移作用,在细菌体内实现外源目的基因向家蚕BmNPV基因组上的转移整合,快速完成重组BmN-PV病毒的构建。