大肠杆菌aroL基因敲除及其对莽草酸合成的影响

编号 zgly0000522208

文献类型 期刊论文

文献题名 大肠杆菌aroL基因敲除及其对莽草酸合成的影响

学科分类 220.3020;森林昆虫学

作者 付小花  高益范  郝思捷  张伯生  任大明 

作者单位 复旦大学生命科学学院遗传学研究所 

母体文献 复旦学报：自然科学版 

年卷期 2007,46(3)

页码 366-370

年份 2007 

分类号 Q96 

关键词 aroL  基因敲除  Red重组系统 

文摘内容 以E.coli DH5α基因组为模板克隆莽草酸激酶Ⅱ基因(aroL),构建质粒pMD-aroL,经HpaⅠ、BsaBⅠ酶切后插入卡那霉素抗性基因(kan)得pMD-aroL：：kan,利用pKD46的λ重组系统,用该质粒上的kan及两端的aroL同源序列替换E.coli Top10F′基因组上的aroL基因,再运用质粒pCP20编码的FLP重组酶消除kan基因.Southern blot证实基因敲除是成功的,测序结果表明kan已经从基因组上消除,摇瓶发酵显示构建的基因工程菌的莽草酸产量是原始菌株的1.57倍。