编号
zgly0001400449
文献类型
期刊论文
文献题名
淋球菌孔蛋白基因与脂寡糖表位融合基因原核表达载体的构建及表达
作者单位
西北农林科技大学动物医学院
军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室
母体文献
动物医学进展
年卷期
2011年05期
年份
2011
分类号
Q78
关键词
淋球菌
孔蛋白
脂寡糖表位
基因融合
表达
文摘内容
PCR扩增淋球菌CMCC29400、CMCC29403株孔蛋白(PI)A、B及表位基因,使用linker GS-GGSG并通过重叠PCR法将表位基因连接在PIA、PIB上形成融合基因PIA-表位、PIB-表位,分别与克隆载体pMD-18T连接,测序正确后将目的基因插入表达载体pET32a(+)中,构建pET32a-PIA-表位、pET32a-PIB-表位、pET32a-PIA和pET32a-PIB重组表达质粒,PCR、双酶切鉴定及测序正确后转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导蛋白表达,经SDS-PAGE鉴定分析,成功表达融合蛋白。