编号 zgly0000321774
文献类型 期刊论文
文献题名 非培养方法在土壤微生物生态学研究中的应用
作者单位 云南大学生物学系 云南大学环境科学系 中山大学基因工程教育部重点实验室
母体文献 生态学杂志
年卷期 2003,22(5)
页码 131-136
年份 2003
分类号 X172
关键词 微生物多样性 磷脂酸 BIOLOG微量板分析 末端限制性酶切片段长度多态性
文摘内容 由于有相当数量的土壤微生物是目前不可培养的, 因此利用传统培养技术来研究土壤微生物, 不仅费时费力, 所得到的结果可能和真实的情况相差甚远。近年来发展了三类不需培养的方法来研究土壤微生物的种类和数量, 这些方法大体上分为生物化学、生理学和分子生物学三类。生物化学方法主要根据细胞膜磷脂酸(PLFA)的种类和数量来判定微生物的多样性; BIOLOG微量板分析系统是生理学方法的代表, 它主要是根据土样细胞悬液对95种单一碳源的利用模式来说明群落结构的变化; 分子生物学方法是发展应用最广的方法。基本步骤是提取土壤的总DNA, 然后用通用引物或选择性高的引物来扩增16SrRNA基因。由于对扩增产物分析方法的不同, 该方法又可分为PCR-DGGE,PCR-RFLP等。最近在PCR-RFLP基础上发展起来的T—RFLP分析方法, 将微生物的多样性分析工作同RDP(ribosomal database project)数据库结合, 充分利用了Internet的数据资源共享的优势, 具有分辨率高, 可实现自动化等优点。是未来土壤微生物生态学研究的有力工具。