五种基于CHD基因的性别鉴定方法对雀形目鸟类有效性的实验评估

编号 zgly0001674966

文献类型 期刊论文

文献题名 五种基于CHD基因的性别鉴定方法对雀形目鸟类有效性的实验评估

作者 苏倡  李显达  邢晓莹  李波  马跃  吴伟  徐艳春 

作者单位 东北林业大学野生动物资源学院  黑龙江中央站黑嘴松鸡自然保护区管理局  国家林业和草原局野生动植物检测中心 

母体文献 野生动物学报 

年卷期 2019年03期

年份 2019 

分类号 Q953 

关键词 雀形目  CHD基因  性别鉴定  有效性评估 

文摘内容 性别鉴定是鸟类研究和保护中的一项基础工作。对于单态型鸟类,通过外观判定性别比较困难。已有的一些方法,如体尺测量、鸣声判定、翻肛鉴别、腹腔镜检、类固醇水平测定和核型分析等,要么可靠性不高,要么操作过程繁琐,要么对鸟体带来伤害。染色体螺旋蛋白结合基因(CHD)在Z和W染色体上内含子的大小存在差异,设计PCR引物来同时扩增Z、W染色体上的内含子片段,有差异者便可判定为雌性,无差异者判定为雄性。目前,常用的引物有5对,分别是P2/P8、2550F/2718R、CHD1F/CHD1R、sex1’/sex-mix和Int P2/Int P8,在24个科中均有尝试,但结果千差万别,实际工作常被误导。本研究以树鹨(Anthus hodgsoni,n=20)、棕眉山岩鹨(Prunella montanella,n=35)、黄眉柳莺(Phylloscopus inornatus,n=76)、黄腰柳莺(Ph. proregulus,n=36)、褐柳莺(Ph. fuscatus,n=20)和灰脚柳莺(Ph. tenellipes,n=27)等6种雌雄同型的雀形目鸟类为材料,从鉴定正确率、PCR体系灵敏度和扩增成功率3个方面对这5对引物的有效性进行了评估。结果表明,引物对sex1’/sex-mix的鉴定正确率为95%,PCR体系灵敏度为10 pg/μL模板浓度,PCR扩增成功率为97%,是性别鉴定的最优选择;引物Int P2/Int P8的正确率达到95%,体系灵敏度为100 pg/μL,但扩增成功率仅为63%,应慎用;2550F/2718R的体系灵敏度为100 pg/μL,扩增成功率仅为85%,但正确率为80%,更应慎用;引物P2/P8的正确率为80%,体系灵敏度为500 pg/μL,但扩增成功率仅为58%,不建议使用;引物CHD1F/CHD1R体系灵敏度为100 pg/μL,但正确率和扩增成功率分别为65%和56%,亦不建议使用。