重组大肠杆菌产CotA漆酶的发酵条件优化

编号 zgly0000768500

文献类型 期刊论文

文献题名 重组大肠杆菌产CotA漆酶的发酵条件优化

学科分类 220.5570;林产化学加工学

作者 张宁  汪春蕾  赵敏  张媛嫒 

作者单位 东北林业大学生命科学学院 

母体文献 应用与环境生物学报 

年卷期 2011,17(4)

页码 563-567

年份 2011 

分类号 TQ925 Q784 

关键词 CotA漆酶  大肠杆菌  重组工程菌  发酵条件优化 

文摘内容 CotA漆酶在环境保护、食品工业和纸浆漂白等工业中具有重要的应用价值.将重组表达载体pET-22b/CotA转入大肠杆菌BL21(DE3), 得到工程菌株, 采用单因素实验和正交实验相结合的方法, 研究诱导表达条件和发酵培养基对重组大肠杆菌产CotA漆酶量的影响.结果表明, 初始pH7.5的培养基中, 添加0.6mmolL^-1Cu^2+, 1gL^-1葡萄糖作碳源、15gL^-1蛋白胨和2gL^-1硫酸铵作氮源, 以10%的接种量, 37℃、200r/min, 直到菌液的D600mm值为1.0, 加入终浓度为1.0mmolL^-1I的IPTG, 25℃诱导12h, 漆酶的产量最高.优化前发酵液的粗提液的漆酶活性仅为1190UmL^-1, 优化后达到3526UmL^-1, 正交实验优化后漆酶活性提高了2.96倍.纯化的CotA漆酶最适反应温度为45℃, 最适pH值为7.2.CotA漆酶对RBBR的脱色率在90%以上, 此CotA漆酶在短时间内对染料能够有效地脱色, 能够成为有潜力的工业用酶.图6表3参17