毛果杨叶肉原生质体分离及BpFLA20基因亚细胞定位

编号 zgly0001721545

文献类型 期刊论文

文献题名 毛果杨叶肉原生质体分离及BpFLA20基因亚细胞定位

作者 于淼  于颖  李泓莹  杨佳绒  王超 

作者单位 东北林业大学 

母体文献 东北林业大学学报 

年卷期 2020年10期

年份 2020 

分类号 S792.11 

关键词 毛果杨  原生质体分离  BpFLA20基因  亚细胞定位 

文摘内容 以毛果杨(Populus trichocarpa)幼嫩叶片为材料,进行原生质体分离,结果表明,酶解液(20 mL)的组成为1.5%纤维素酶R10+0.4%离析酶+2 mL 0.2 mol/L MES+10 mL 0.8 mol/L甘露醇+0.2 mL 2 mol/L KCl,所得原生质体为2×10~5个细胞/mL。在此基础上,对白桦中一个FLA(fasciclin-like arabinogalactan-protein)基因BpFLA20进行了亚细胞定位研究。系统进化分析显示,BpFLA20蛋白在序列上与次生壁合成相关的AtFLA11和AtFLA12蛋白相近。以白桦的根、茎、叶cDNA为模版,进行了荧光定量PCR实验,结果表明该基因在根中的表达量最高,在叶中的表达量最低。以本研究分离的毛果杨原生质体为受体,利用PEG介导的原生质体瞬时转化法将35S::FLA20-GFP融合表达载体转化到毛果杨原生质体中进行亚细胞定位研究,结果显示,BpFLA20蛋白定位于细胞膜。