腺病毒介导细胞外信号调节激酶2表达对去分化软骨细胞增殖及胞外基质合成的影响

编号 zgly0000447807

文献类型 期刊论文

文献题名 腺病毒介导细胞外信号调节激酶2表达对去分化软骨细胞增殖及胞外基质合成的影响

作者 季煜华  曾耀英  俞瑜  邢飞跃  王会营  江颖娟 

作者单位 暨南大学组织移植与免疫研究中心 

母体文献 中国临床康复 

年卷期 2006,10(17)

页码 82-84,i0005

年份 2006 

分类号 R681.3 

关键词 软骨细胞  腺病毒科  细胞外基质  动物  基因修饰 

文摘内容 目的: 观察腺病毒介导细胞外信号调节激酶2的过度表达对去分化软骨细胞增殖和细胞外基质合成的影响, 以及腺病毒介导细胞外信号调节激酶2用于修饰去分化软骨细胞的可行性。
方法: 实验于2004-09/2005-05在暨南大学组织移植与免疫研究中心进行。SD大鼠5只, 周龄为3-5周, 此处请核对体质量为(150±20)g, 分离、培养大鼠肋生长板软骨细胞, 利用Adeasy系统构建携带细胞外信号调节激酶2基因的腺病毒载体。流式细胞仪检测不同感染复数的携带细胞外信号调节激酶2基因的腺病毒载体感染第5代大鼠肋生长板软骨细胞的效率, Western blot检测携带细胞外信号调节激酶2基因的腺病毒载体感染大鼠肋生长板软骨细胞中细胞外信号调节激酶1/2和磷酸化细胞外信号调节激酶2的表达, ^3H-TdR,^3H-proline和^35 S-sulfate同位素掺入检测携带细胞外信号调节激酶2基因的腺病毒载体感染对大鼠肋生长板软骨细胞增殖、胶原和蛋白多糖合成的影响。
结果: ①成功构建携带细胞外信号调节激酶2基因的腺病毒载体重组腺病毒。②100感染复数的携带细胞外信号调节激酶2基因的腺病毒载体感染第5代大鼠肋生长板软骨细胞的效率大于90%。③携带细胞外信号调节激酶2基因的腺病毒载体感染的第5代大鼠肋生长板软骨细胞中细胞外信号调节激酶1/2和磷酸化细胞外信号调节激酶2的表达均显著增加, 分别是Ad-CMV组的15.58和1.85倍。④同位素检测结果表明携带细胞外信号调节激酶2基因的腺病毒载体的感染促进^3H-TdR、^3H-proline和^35S-sulfate的掺入, 分别是对照组的2.52, 1.61和1.53倍(P〈0.05)。
结论: 腺病毒介导细胞外信号调节激酶2基因的过度表达促进去分化大鼠肋生长板软骨细胞的增殖和细胞外基质成分的合成。