含硫氨基酸基因植物表达载体的构建及对百脉根的转化

编号 zgly0001371296

文献类型 期刊论文

文献题名 含硫氨基酸基因植物表达载体的构建及对百脉根的转化

作者 关宁  王涌鑫  李聪  苗丽宏  张博 

作者单位 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所牧草遗传育种研究室  新疆农业大学草地资源与生态自治区重点实验室 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2009年02期

年份 2009 

分类号 S541.6 

关键词 含硫氨基酸基因  表达载体构建  百脉根  转化 

文摘内容 在本研究中,用限制性内切酶NcoⅠ和BglⅡ从中间载体pMD18zeolin和pMD18zein上切下zeolin基因(约1600bp)和γ-zein基因(约720bp),将其定向连接在经相同酶切的质粒载体pCAMBIA1302上,构建成植物表达载体pCBzeolin和pCBzein。采用冻融法将pCBzeolin和pCBzein导入根癌农杆菌(Agrobac-terium tumefaciens)菌株LBA4404,利用该菌株转化百脉根(Lotus corniculatusL.)。经过共培养、筛选分化、再生,得到抗性植株。对抗性植株进行了PCR、RT-PCR检测表明,γ-zein和zeolin基因已经整合到百脉根基因组中,在核酸水平得到了表达。含硫氨基酸数据分析表明,转zeolin基因植株含硫氨基酸含量极显著高于转γ-zein基因植株和对照植株的含量(P<0.01),但转γ-zein基因植株与对照植株间差异不显著。