毛白杨两个Phi类GST基因的克隆及生化特性

编号 zgly0001435123

文献类型 期刊论文

文献题名 毛白杨两个Phi类GST基因的克隆及生化特性

作者 李迪  唐振鑫  刘海静  曾庆银  杨海灵 

作者单位 北京林业大学生物科学与技术学院  中国科学院植物研究所系统与进化植物学国家重点实验室 

母体文献 植物学报 

年卷期 2012年03期

年份 2012 

分类号 S792.117 

关键词 克隆  酶活性  谷胱甘肽转移酶  毛白杨  蛋白结构 

文摘内容 谷胱甘肽转移酶(glutathione S-transferase,GST)在植物的抗逆反应、细胞信号转导和抗病等方面发挥着重要作用。从毛白杨(Populustomentosa)中克隆到2个Phi类GST基因(PtoGSTF1和PtoGSTF2),它们分别编码215和218个氨基酸残基的蛋白质。DNA序列分析显示这2个基因均含有2个内含子。组织表达模式分析表明,这2个基因在毛白杨的根、茎、叶、韧皮部和顶芽组织中均表达,是组成型表达基因。在大肠杆菌中表达这2个基因并纯化重组蛋白。酶活性分析显示PtoGSTF1和PtoGSTF2蛋白对底物CDNB、NBD-Cl、NBC和Cum-OOH都具有酶学活性,但活性差异较大。动力学分析显示,PtoGSTF2对NBD-Cl的亲和力是PtoGSTF1的2.5倍,但PtoGSTF1的催化效率是PtoGSTF2的56.8倍。热力学稳定性分析显示,PtoGSTF1比PtoGSTF2具有更高的热力学稳定性。因此,酶学性质的差异预示着这2个Phi类GST基因可能存在功能上的分化。