香蕉束顶病毒中国漳州分离物DNA 4的克隆及非编码区的启动子活性初探(英文)

编号 zgly0001257401

文献类型 期刊论文

文献题名 香蕉束顶病毒中国漳州分离物DNA 4的克隆及非编码区的启动子活性初探(英文)

作者 孙德俊  魏红艳  蔡文启  田颖川 

作者单位 中国科学院微生物研究所  中国科学院微生物研究所 北京100080  北京100080  北京100080 

母体文献 Acta Botanica Sinica 

年卷期 2002年08期

年份 2002 

分类号 Q785 

关键词 香蕉束顶病毒漳州分离物DNA4  5′RACE  启动子  GFP  GUS 

文摘内容 应用PCR方法克隆了香蕉束顶病毒中国漳州分离物 (BananabunchytopvirusChineseZhangzhouisolate ,BBTV_ZZ)DNA 4。序列分析表明其序列全长为 10 39nt,归属于亚洲组。 5′RACE分析确定其转录起始位点是 2 6 9nt处的A。利用PCR方法亚克隆了BBTV_ZZDNA 4非编码区序列并将其插入到植物表达载体pCAMBIA 130 4中的gfp∶∶gus基因上游得到重组质粒pTA2。将含pTA2和pCAMBIA 130 4的根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens)注射进烟草 (NicotianatabacumL .cv .XanthiNC)叶片 ,3～ 5d后剪下注射部位的叶片进行GUS和GFP的表达分析。pTA2 (含BBTV_ZZDNA 4非编码区 )、pCAMBIA 130 4 (含CaMV 35S启动子 )和未注射的烟草叶片的GUS活性分别为 1 0 0 70pmolMU·μg-1·min-1,2 .0 6 90pmolMU·μg-1·min-1和 0 .0 2 14pmolMU·μg-1·min-1。注射含pTA2和pCAMBIA 130 4植物表达载体根癌土壤杆菌以及未注射的烟草叶片的每毫克总蛋白的GFP间接ELISA在 4 90nm的吸光值分别为89 5 77、10 0 4 4 0和 3 2 87。