切割桑花叶萎缩类病毒的12串联体核酶基因克隆与转录载体构建

编号 zgly0000810312

文献类型 期刊论文

文献题名 切割桑花叶萎缩类病毒的12串联体核酶基因克隆与转录载体构建

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 孔卫青  杨金宏 

作者单位 安康学院陕西省蚕桑重点实验室 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2013(4)

页码 638-642

年份 2013 

分类号 S888.712 Q782 

关键词 桑花叶型萎缩病  类病毒  12串联体核酶基因  转录载体  切割活性 

文摘内容 通过人工合成和PCR扩增,克隆特异性切割桑花叶萎缩类病毒RNA的12串联体核酶基因,用于控制病毒基因的表达。将桑花叶萎缩类病毒正链RNA上10 nt的靶序列连接在锤头型核酶催化区3’端,构成具有自切割功能的核酶基因。克隆该核酶基因并将其连接于载体pMD18T-SP6。在SP6 RNA聚合酶的作用下对线性化的重组质粒进行体外转录,体外自切割反应显示转录的多体自切割核酶可以通过内部的顺式切割释放出核酶分子。同时,将该12串联体核酶基因导入双元质粒pBI121中,获得重组植物转录载体pBI121-12MRz,为进一步培育抗桑花叶型萎缩病的转基因桑树奠定了基础。