发根农杆菌转化怀地黄再生植株

编号 zgly0000518864

文献类型 期刊论文

文献题名 发根农杆菌转化怀地黄再生植株

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 周延清  牛敬媛  郝瑞文  林雪  贾敬芬  郝建国  卢龙斗 

作者单位 河南师范大学生命科学学院  西北大学生命科学学院 

母体文献 分子细胞生物学报 

年卷期 2007,40(4)

页码 223-231

年份 2007 

分类号 Q943 

关键词 怀地黄  发根农杆菌  毛状根  植株再生  Southern  blot  冠瘿碱纸电泳 

文摘内容 利用发根农杆菌15834菌株感染怀地黄组培苗子叶、叶柄和茎切段，建立了有效的毛状根培养及其植株再生体系。毛状根可直接从受伤的外植体产生，能在无外源激素的1／2MS固体和液体培养基上自主生长，表现出典型的发根特征。用100μmol／L乙酰丁香酮处理对数生长期的农杆菌菌液感染子叶获得了46．7％的最高转化频率：在附加0．2mg／LKT和3．0mg／L6-BA的1／2MS培养基上，毛状根能100％形成愈伤组织，51．49％分化出芽；分化芽在1／2MS培养基上100％生根，形成具有矮化、节间短和根系发达等特征的转化再生植株且移栽后生长旺盛；1个转化毛状根克隆的梓醇含量为0．557mg／g，是鲜地黄梓醇含量的48．5％，是生地鲜重梓醇含量的18％。rolB基因PCR、Southern blot分析、冠瘿碱纸电泳和RT—PCR扩增检测证明农杆菌Ri质粒上的T—DNA整合到怀地黄基因组中并表达。