原生动物单细胞PCR应用初探——以天蓝喇叭虫为例

编号 zgly0000571401

文献类型 期刊论文

文献题名 原生动物单细胞PCR应用初探——以天蓝喇叭虫为例

作者 刘志新  余育和 

作者单位 中国科学院水生生物研究所  中国科学院研究生院 

母体文献 湖泊科学 

年卷期 2008,20(5)

页码 669-674

年份 2008 

分类号 Q949.751.9  S652.603.2 

关键词 单细胞PCR  单细胞全基因组扩增  原生动物  天蓝喇叭虫 

文摘内容 以天蓝喇叭虫(Stentor coeruleus)为研究对象，探索了单细胞单基因PCR扩增及单细胞全基因组PCR扩增技术在原生动物中的应用．经过不断探索和优化条件后，试验取得了理想的结果．在40例单细胞单基因(SSU rDNA基因全序列)VCR的一次性扩增中，新鲜细胞和经过中性红染色的细胞都获得了100％的成功率，室温下酒精(95％)保存一周的细胞获得了82．5％的成功率．在单细胞全基因组PCR扩增中，采用高效高保真的phl29DNA聚合酶结合随机引物(Random Primer)进行扩增，获得了丰富且质量较高的PCR产物．以全基因组扩增产物(稀释10倍)对四个常用的基因位点(TEF1、SSU rRNA、18S-ITS1-5．8S、a-tubulin)进行扩增，均成功获得相应的基因片断．。