编号 zgly0001433501
文献类型 期刊论文
文献题名 百合抗镰刀菌资源鉴定及抗病相关基因筛选
作者 马璐琳 张艺萍 丁鲲 吴丽芳 王祥宁 崔光芬 贾文杰 段青 王继华
作者单位 云南省农业科学院花卉研究所 云南省花卉育种重点实验室 云南省农村科技服务中心
母体文献 园艺学报
年卷期 2012年06期
年份 2012
分类号 S682.29
关键词 百合大花卷丹 百合尖孢镰刀菌 SSH文库 基因表达分析
文摘内容 对20个百合种质资源的组培苗进行尖孢镰刀菌百合专化型(Fusarium oxysporum f.sp.lilii)室内接种鉴定;以筛选出有较好抗性的大花卷丹(Lilium leichtlinii var.maximowivzii Baker)为材料,以镰刀菌诱导12和24 h的作为处理组,无菌水处理作为对照组,采用SMART技术构建了百合经镰刀菌诱导后的抑制差减正、反向两个SSH文库。在正向文库中选择了4个抗病相关的ESTs,用半定量RT-PCR分析这些ESTs的表达情况。经接种鉴定,20个百合种质资源中,对百合镰刀菌表现高抗的有3个,中抗9个,感病8个;SSH文库ESTs片段大小为200~2 000 bp。依据斑点杂交结果,从正向SSH文库中挑取50个单克隆进行测序和比对分析,得到6种共10条抗病相关EST。通过半定量RT-PCR对其中的4条抗病相关ESTs:丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine protein kinase,S/TPK)、谷胱甘肽S–转移酶(glutathione S-transferase,GST)、过氧化物酶(peroxidase,POD)和亲环素(cyclophilin,CYP)的表达情况进行了分析,证明它们在一定程度上都受百合镰刀菌诱导而表现上调表达,推测其可能参与了百合对镰刀菌枯萎病的抗病过程。