3种方法提取菠萝蜜叶片和种子总RNA的比较

编号 zgly0001670481

文献类型 期刊论文

文献题名 3种方法提取菠萝蜜叶片和种子总RNA的比较

作者 张宇  黄国弟  莫永龙  欧克纬  艾静汶  何江 

作者单位 广西农业科学院亚热带作物研究所 

母体文献 经济林研究 

年卷期 2019年02期

年份 2019 

分类号 S667.8 

关键词 菠萝蜜  叶片  种子  总RNA 

文摘内容 为了筛选最适的菠萝蜜总RNA提取方法,采用Trizol提取法、Tris-硼酸提取法和试剂盒提取法提取菠萝蜜叶片和种子总RNA,通过紫外分光光度计检测、琼脂糖凝胶电泳、RT-PCR检测以及Agilent2100检测,对提取结果进行比较分析。结果表明:采用这3种方法均能从菠萝蜜叶片和种子中提取到总RNA,Tris-硼酸提取法较其他2种方法所提取的总RNA产率高,但杂质较多;采用Tris-硼酸提取法能提取完整性较好的总RNA,28S、18S和5S清晰可见,但提取质量较试剂盒提取法差;试剂盒提取法省时省力,有明显的28S和18S条带,A260/A280分布在1.92～1.98,A260/A230分布在2.04～2.09,叶片总RNA产率42.3 ng/μL,种子总RNA产率15.6 ng/μL。RT-PCR检测结果表明在约200 bp处存在清晰整洁的电泳条带,Agilent 2100检测结果显示杂峰极少,28S峰积分面积约是18S峰积分面积的2倍。经综合评定认为,试剂盒提取法是适合菠萝蜜叶片和种子总RNA提取的方法。