大花蕙兰基因组DNA提取及RAPD反应条件探索

编号 zgly0000450971

文献类型 期刊论文

文献题名 大花蕙兰基因组DNA提取及RAPD反应条件探索

作者 李冬梅  朱根发  叶庆生 

作者单位 华南师范大学生命科学学院  广东省植物发育生命工程重点实验室  广东省农业科学院花卉研究所 

母体文献 热带亚热带植物学报 

年卷期 2006,14(1)

页码 25-30

年份 2006 

分类号 Q523 

关键词 大花蕙兰  基因组DNA提取  CTAB  RAPD 

文摘内容 用SDS、CTAB和改良CTAB法分别提取大花蕙兰叶片基因组DNA, 发现以改良CTAB法提取的DNA纯度高, 产率也较高。以5’-GGTGCTCCGT-3’(BA440)为随机引物, 并以大花蕙兰品种‘金杯’(Cymbidium hybridium CV.Hiroshima Golden Cup“Sunny Moon”)的DNA为模板, 对RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA)反应体系进行了优化研究, 结果表明, 25μl反心体系中, Mg^2+、Taq DNA聚合酶、引物、模板DNA和dNTP5种主要成分的适宜浓度或用量分别是: 2.0mmol/L、L0U、0.20μmol/L、25ng和0.20mmol/L。扩增程序优化为: 94℃预变性4min; 94℃变性0.5min, 37℃退火1min, 72℃延伸1min, 40个循环; 最后72℃延伸7min。