牛分支杆菌CFP-10的原核表达及其在牛结核病诊断中的应用

编号 zgly0001323537

文献类型 期刊论文

文献题名 牛分支杆菌CFP-10的原核表达及其在牛结核病诊断中的应用

作者 李超然  别克·吐尔逊  蔡宏  朱玉贤 

作者单位 北京大学蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室  北京大学蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室 北京100871  北京100871 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2007年08期

年份 2007 

分类号 S854.43  S858.23 

关键词 牛结核病  间接酶联免疫吸附试验  CFP-10  ESAT-6 

文摘内容 低分子质量的蛋白抗原CFP-10是一种重要的牛分支杆菌早期分泌蛋白。为了检测该蛋白和其他几种抗原在牛结核病诊断中的临床应用,对CFP-10的基因进行克隆,鉴定,并在原核系统中表达。PCR法扩增cfp-10基因片段,连接到pET-22b(+)原核表达载体中,再转入表达宿主E.coliBL21(DE3)PlysS菌株内,用IPTG诱导,进行蛋白表达、纯化。分别以CFP-10、ESAT-6、MPT83、MPT70、牛PPD、CFP-10与ESAT-6混合蛋白,MPT83与MPT70混合蛋白为抗原,用间接ELISA法诊断牛结核病。结果表明,以CFP-10与ESAT-6混合蛋白作为抗原检测牛结核病的特异性和敏感性分别达到了100%和63.6%,均超过了其他单抗原或抗原组合,为以筛选合适抗原为基础的血清学诊断技术提供了有力的支持并创造了良好的应用前景。