胡萝卜抗冻蛋白基因克隆及植物表达载体构建

编号 zgly0001229611

文献类型 期刊论文

文献题名 胡萝卜抗冻蛋白基因克隆及植物表达载体构建

作者 尹明安  崔鸿文  樊代明  郭立 

作者单位 西北农林科技大学园艺学院!陕西杨陵712100  第四军医大学西京医院!西安710032  西北农林科技大学生命科学学院!陕西杨陵712100 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2001年01期

年份 2001 

分类号 Q789 

关键词 胡萝卜  抗冻蛋白基因  分子生物学 

文摘内容 以胡萝卜品种 Autumn King的幼苗为材料 ,用 CTAB法提取其基因组 DNA,以 PCR ( Polym eraseChain Reaction)的方法在体外扩增出胡萝卜抗冻蛋白基因 ( afp) ,以 p UCm - T Vector为载体构建成胡萝卜 afp的克隆载体 p TAF,用 Eco R 消化重组质粒 p TAF使其线性化 ,再用 DNA聚合酶 Klenow大片段补平末端 ,然后用Xba 消化 ,获得一末端粘 ,一末端平的目的片段 ( afp)。植物表达载体 p BI12 1用 X ba 和 Sma 双酶切 ,获得一末端粘 ,一末端平的线性质粒。将目的片段与线性质粒在 T4DNA连接酶的作用下进行定向连接 ,构建成胡萝卜 afp的植物表达载体 p BAF