异硫氰酸胍-酚-氯仿—步法提取RNA时某些操作技术的改进

编号 zgly0001172357

文献类型 期刊论文

文献题名 异硫氰酸胍-酚-氯仿—步法提取RNA时某些操作技术的改进

作者 徐杰  李明启 

作者单位 华南师范大学生物技术研究所!广州  510631  华南农业大学光合作用研究室!广州  510642 

母体文献 植物生理学通讯 

年卷期 1996年03期

年份 1996 

分类号 Q781 

关键词 RNA  酚-氯仿  RNase  异硫氰酸胍  操作技术  变性剂  双蒸水  体外翻译  外源  实验的重复 

文摘内容 在异硫氰酸肥和卜流基乙醇等变性剂存在的情况下，RNase是不会起作用的，含RNA，DNA和RNase的溶液（水相）在酸性pH下经酚／氯仿反复抽提使RNase蛋白变性，而RNA游离进入水相的能力明显优于DNA，反复抽提后的水相经异丙醇沉淀，便可获得高质量的RNA。样品粉碎后，酚／氯仿反复抽提在超净台中进行，其余操作在带盖的经处理的离心管内完成，排除了外源RNase污染的可能性。由于变性剂始终和＊＊A在一起（水相），内源RNase虽存在，但不起作用。故该方法具有快速、简便、能同时处理多个样品的优点，重复性和RNA质量都较好，完全能满足Northernhi。t、体外翻译和建立CDNA库的要求。该方法