结核分枝杆菌Rv1400c多抗制备及反应原性分析

编号 zgly0001495206

文献类型 期刊论文

文献题名 结核分枝杆菌Rv1400c多抗制备及反应原性分析

作者 陶荣珊  胡太超  李金伟  刘思国  王全凯 

作者单位 吉林农业大学动物科学技术学院  北海绿瑞贸易有限责任公司  东丰药业  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室  吉林省中韩动物科学研究院 

母体文献 经济动物学报 

年卷期 2015年01期

年份 2015 

分类号 S852.618 

关键词 结核分枝杆菌  Rv1400c  包涵体  复性  反应原性 

文摘内容 将pET28b-Rv1400c重组表达质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,筛选出阳性菌株并增菌培养后IPTG诱导表达,离心后沉淀用SKL变性溶解,用亲和层吸树脂纯化Rv1400c蛋白,通过SDS-PAGE和Western-blot分析目的蛋白表达与纯化情况;利用Rv1400c蛋白免疫新西兰兔,制备多克隆抗体;Western-blot分析鹿结核阳性血清的反应情况。SDS-PAGE和Western-blot结果显示:Rv1400c以包涵体形式表达,蛋白分子质量为39 ku;目的蛋白免疫新西兰兔后,ELISA检测血清效价达到1∶51 200。纯化的Rv1400c重组抗原蛋白能与鹿的阳性血清发生体外结合反应。