利用CRISPR-Cas9基因编辑技术获得水稻osarf8-1杂合突变体

编号 zgly0001639761

文献类型 期刊论文

文献题名 利用CRISPR-Cas9基因编辑技术获得水稻osarf8-1杂合突变体

作者 王道洋  黄国强  陈明姣  何先畅  常淑伟  张大兵 

作者单位 上海交通大学生命科学技术学院 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2018年12期

年份 2018 

分类号 S511 

关键词 水稻  OsARF8  生长素  CRISPR/Cas9 

文摘内容 为了研究生长素是如何参与调控植物的生长发育过程,我们利用CRISPR-Cas9基因编辑技术,设计水稻生长素响应因子OsARF8的两个靶点,对水稻中的该基因进行敲除。构建基因编辑载体pBIN-sg R-Cas-Os,通过农杆菌介导转化水稻品种‘9522’。我们从潮霉素抗性筛选出的28株转基因植株中鉴定得到针对OsARF8的一种杂合突变类型,共计6棵在外显子第174号碱基处缺失一个C碱基的杂合突变类型osarf8-1,该处碱基突变所对应的是第7个氨基酸的变化,导致亮氨酸(Leu)变成色氨酸(Trp),自此处开始随后的氨基酸序列发生移码突变,并且提前终止于第123个氨基酸,正好位于Os ARF蛋白的DBD功能域的最始端(DBD为120~222个氨基酸),说明DBD功能域在该突变体中完全不能表达,ARF8蛋白的功能将受到极大的影响。本研究成功利用CRISPR-Cas9基因编辑技术精确地敲除了水稻OsARF8基因,为CRISPR技术在水稻中的应用提供了一个可供参考的范例,同时也为进一步研究OsARF8基因功能提供了重要的参考依据。