重大检疫性害虫玉米根萤叶甲的种特异性SS-CO Ⅰ快速检测技术研究

编号 zgly0001659571

文献类型 期刊论文

文献题名 重大检疫性害虫玉米根萤叶甲的种特异性SS-CO Ⅰ快速检测技术研究

作者 张桂芬  王玉生  郭建洋  冼晓青  万方浩  张金良  王福莲  张亚宁 

作者单位 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室  农业部外来入侵生物预防与控制研究中心  北京市植物保护站  长江大学农学院 

母体文献 植物保护 

年卷期 2019年01期

年份 2019 

分类号 S435.132 

关键词 玉米根萤叶甲  SS-COⅠ标记  种特异性引物  快速鉴定  分子检测 

文摘内容 玉米根萤叶甲在欧洲和美国是一种严重为害玉米的入侵性害虫,传播速度快,侵入我国的可能性极高。本文针对其难以快速准确进行形态鉴别的问题,以玉米根萤叶甲为研究对象,以其他9种/生物型叶甲总科常见害虫为参照,采用基于COⅠ基因的种特异性PCR方法(species-specific COⅠ, SS-COⅠ),研究其快速分子检测鉴定技术。通过提取10种/生物型叶甲DNA和通用型引物扩增测序,获得其基因片段的碱基序列,并比对分析设计1对玉米根萤叶甲特异性引物(DvvZCE1/DvvZCF1),其扩增片段为462 bp。种特异性检验结果显示,该对引物只对玉米根萤叶甲的COⅠ基因具有扩增能力,对其他常见叶甲类害虫,包括玉米双斑长跗萤叶甲、榆黄毛萤叶甲、黄曲条跳甲、油菜蚤跳甲、黄点直缘跳甲、莲草直胸跳甲、枸杞负泥虫以及褐足角胸叶甲的棕黄型和蓝绿型没有扩增能力,该对引物不仅对成虫有很好的扩增效果,对单粒卵、2龄幼虫以及成虫残体(包括触角、头部、胸部、腹部、前足、后足)也具有同样的扩增效果,其最低检出阈值为102.73 pg/μL(相当于1/122 880头雌性成虫)。玉米根萤叶甲特异性SS-COⅠ检测技术在其口岸检疫,以及有效阻截中具有重要意义。