胡萝卜肉质根线粒体DNA提取方法研究

编号 zgly0000646180

文献类型 期刊论文

文献题名 胡萝卜肉质根线粒体DNA提取方法研究

作者 张智  王永勤  侯雷平  关绚丽  李梅兰  梁毅 

作者单位 北京市农林科学院蔬菜研究中心  山西农业大学研究生学院 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2010(1)

页码 191-195

年份 2010 

分类号 S792.14  Q959.468 

关键词 胡萝卜  线粒体  mtDNA  提取方法  PCR 

文摘内容 本研究以胡萝卜根为材料，通过高盐差速离心和蔗糖沉淀差速离心两种方法提取线粒体DNA。通过改变缓冲液、使用DNaseI处理得到了无核DNA污染的线粒体。用SDS和蛋白酶K裂解线粒体，经酚：氯仿：异戊醇抽提除去蛋白，并用RNaseA消化从而得到单纯线粒体DNA。本实验还特别设计了叶绿体特异性引物检测线粒体DNA纯度。结果表明：利用优化后的蔗糖沉淀差速离心法提取胡萝卜线粒体DNA，所得线粒体DNA纯度高、产量高，每克肉质根能够得到27．60ug线粒体DNA。