珍稀濒危植物香果树RAPD反应条件的优化

编号 zgly0000514249

文献类型 期刊论文

文献题名 珍稀濒危植物香果树RAPD反应条件的优化

学科分类 220.1070;森林植物学

作者 杨敬元  熊丹  梁宏伟  王玉兵  廖明尧  陈发菊 

作者单位 湖北省神农架自然保护区管理局  三峡大学生物技术中心-湖北省天然产物利用与研究重点实验室 

母体文献 浙江林学院学报 

年卷期 2007,24(3)

页码 279-283

年份 2007 

分类号 S718.4 

关键词 植物学  香果树  基因组DNA  随机扩增多态性DNA 

文摘内容 以采自湖北省神农架地区的14株香果树Emmenopterys henryi为材料,提取其叶片基因组DNA,并以其基因组DNA为模板进行随机扩增多态性DNA(RAPD)反应条件的优化。RAPD反应条件中的各个因子,包括模板DNA质量浓度、引物浓度、dNTP浓度、DNA聚合酶浓度和Mg2＋浓度。结果表明,香果树基因组DNA在以下条件有较好的扩增效果：25μL体系中,Taq酶1.33×10-3kat.L-1;随机引物0.5μmol.L-1;Mg2＋2.6 mmol.L-1;dNTP 220μmol.L-1;DNA模板4.40 mg.L-1。聚合酶链式反应(PCR)程序为：94℃预变性5 min,94℃变性1 min,43℃退火1 min,72℃延伸2 min,经过40个循环,最后72℃延伸8 min。此体系和反应程序可获得比较稳定的扩增结果。