蜻蜓凤梨AfAP2-1基因的克隆与表达载体构建

编号 zgly0001496220

文献类型 期刊论文

文献题名 蜻蜓凤梨AfAP2-1基因的克隆与表达载体构建

作者 张静  张学全  李志英  雷明  徐立 

作者单位 华中农业大学植物科学技术学院  中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所  农业部华南热带作物基因资源与种质创制重点开放实验室  海南大学农学院 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2015年06期

年份 2015 

分类号 S682.36 

关键词 蜻蜓凤梨  Af AP2-1  过表达 

文摘内容 通过对蜻蜓凤梨转录组数据的分析,我们获得一个跟拟南芥AP2同源片段,基于此设计引物,利用RACE技术首次从蜻蜓凤梨中克隆到完整的Af AP2-1序列,其c DNA全长2 185 bp,开放阅读框全长1 404 bp,编码467个氨基酸。保守结构域分析其含有两个AP2结构域,属于AP2亚家族。系统进化树分析发现该蛋白与拟南芥的AP2 RAP2.7亲缘关系较近。通过在CDS序列两端分别引入XbaⅠ和KpnⅠ限制性内切酶酶切位点,我们成功构建了Ca MV35S-Af AP2-1-GUS过表达载体。利用农杆菌介导法转化拟南芥植株后,再通过GUS染色和RNA水平鉴定发现Ca MV35S-Af AP2-1-GUS已转入拟南芥中并且能正常表达。本研究可为Af AP2-1的功能鉴定奠定基础,对深入研究凤梨科植物开花调控的分子机理具有重要意义。