果实特异启动子调控薄皮甜瓜ACC合成酶cDNA反义表达载体的构建

编号 zgly0000462379

文献类型 期刊论文

文献题名 果实特异启动子调控薄皮甜瓜ACC合成酶cDNA反义表达载体的构建

作者 郭庆勋  秦智伟  李景鹏 

作者单位 吉林大学  东北农业大学 

母体文献 果树学报 

年卷期 2006,23(3)

页码 411-414

年份 2006 

分类号 S652 

关键词 薄皮甜瓜  反义ACC合成酶基因  特异启动子  植物表达载体 

文摘内容 应用反义RNA技术抑制甜瓜成熟过程中内源乙烯的合成,从而培育耐贮运品种是解决甜瓜延熟保鲜难题的可行新方法。根据GenBank中甜瓜、黄瓜ACC合成酶基因氨基酸保守序列设计引物,从成熟的薄皮甜瓜(齐甜1号)果肉组织中提取总RNA,经RT-PCR扩增得到约0.7 kb的ACC合成酶cDNA片段,将其克隆到质粒载体pGEM-TEasy中,测序表明,该基因为777 bp,编码258个氨基酸;从番茄(东农706)叶片组织中提取总DNA,经PCR扩增得到约2.2 kb的E8基因片段,将其克隆到质粒载体pGEM-T Easy中,测序表明,该基因为2192 bp;以pCAM2301为起始植物表达载体,pCAM-GT为中间载体,成功构建了果实特异启动子(E8)调控薄皮甜瓜ACC合成酶cDNA反义表达载体,采用冻融法将其转入根癌农杆菌LBA4404,得到了完整的Ti质粒表达载体系统。