家蚕吡哆醛激酶的融合表达与纯化

编号 zgly0001381485

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕吡哆醛激酶的融合表达与纯化

作者 张平平  张剑韵  黄龙全 

作者单位 安徽农业大学生命科学院  安徽农业大学茶与食品科技学院 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2010年09期

年份 2010 

分类号 Q78  Q96 

关键词 家蚕  吡哆醛激酶  融合表达  纯化  酶活性 

文摘内容 【目的】吡哆醛激酶(pyridoxal kinase,PLK,EC2.7.1.35)是维生素B6的关键代谢酶。本研究原核表达家蚕Bombyxmori重组PLK,为进一步开展家蚕PLK的催化作用机制和表达调控机制的研究奠定基础。【方法】构建家蚕PLK基因融合表达质粒,转化大肠杆菌Escherichia coli诱导表达,经Ni2+亲和层析纯化后,对融合蛋白的催化活性进行分析。【结果】纯化后的家蚕重组PLK经SDS-PAGE鉴定为单一条带,比活力为1800U/mg,纯化倍数为40倍。在底物过量的条件下,该重组酶的体外最适反应温度是50℃;最适pH为5.5~6;Zn2+是酶促反应有效的激活剂。【结论】重组家蚕PLK与来源于家蚕组织的PLK具有相同的催化性质。