根霉α-半乳糖苷酶的三相分离及其酶学性质

编号 zgly0001435267

文献类型 期刊论文

文献题名 根霉α-半乳糖苷酶的三相分离及其酶学性质

作者 王剑锋  王璋  李江  饶军 

作者单位 东华理工大学生物系  中国食品发酵工业研究院 

母体文献 菌物学报 

年卷期 2012年02期

年份 2012 

分类号 Q814 

关键词 棉子糖  蜜二糖  对硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷  三相分离 

文摘内容 根霉Rhizopus sp.A01发酵豆渣产α-半乳糖苷酶,粗酶液依次经过三相分离、Sephadex G-100凝胶过滤获得了电泳纯的α-半乳糖苷酶,纯化了6.7倍,总酶活回收率达到46%;凝胶过滤和SDS-PAGE显示该酶为相对分子质量为87.6kDa的单体蛋白。该酶水解对硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷的最适pH值为5.0,最适温度为55℃,表观Km、kcat/Km分别为2.56mmol/L、47,400L/mol·s;能微弱水解蜜二糖和棉子糖,水解蜜二糖的速率是水解棉子糖速率的3.4倍;水解活性受多种金属离子的明显抑制,其中Ca2+、Cu2+、Fe3+、Hg+、Mn2+等几乎完全抑制酶活性。该酶活性在pH4.5-9.0保持稳定,在55℃时保温120min,酶活残留48%。