农杆菌介导转化法构建转CTV—cp的枳壳植株

编号 zgly0000254150

文献类型 期刊论文

文献题名 农杆菌介导转化法构建转CTV—cp的枳壳植株

作者 贺红  韩美丽 

作者单位 广州中医药大学中药所  广西林业科学研究院 

母体文献 中国中药杂志 

年卷期 2001,26(1)

页码 21-23

年份 2001 

分类号 S567  S603.6 

关键词 枳壳  外壳蛋白基因  植物转化  中药 

文摘内容 目的: 采用农杆菌介导法, 将能抑制病毒侵染的外壳蛋白基因转入枳壳, 为通过基因转化进行枳壳的抗病育种提供依据和方法。方法: 以枳壳实生苗上胚轴为材料, 农杆菌菌株为EHA101, 含有质粒载体pGA482GG。质粒上插入了35s启动子驱动的外源目的基因-柑桔衰退病病毒外壳蛋白基因(CTV-cp)及GUS, NPTⅡ基因。结果: 枳壳转化试验中, 抗菌素采用头孢霉素较好, 浓度为300mg·L^-1; 以卡那素作为选择试剂, 浓度为50mg·L^-1; 转化获得的抗性植株, GUS检测结果, 70.0%的植株呈阳性反应; Southern杂交分析(Southern blot)鉴定证明外悫在因已整合到枳壳植株的核基因组中。结论: 通过农杆菌介导的转化法, 成功地获得了转外壳蛋白基因的枳壳植株。