菜心ISSR-PCR反应体系的优化

编号 zgly0000548737

文献类型 期刊论文

文献题名 菜心ISSR-PCR反应体系的优化

作者 孙雪梅  乔爱民  孙敏  桂腾琴 

作者单位 西南大学生命科学学院  仲恺农业技术学院农业与园林学院 

母体文献 西南大学学报：自然科学版 

年卷期 2007,29(10)

页码 129-133

年份 2007 

分类号 Q789 

关键词 菜心  简单序列重复间区(ISSR)  反应体系 

文摘内容 以菜心(Brassica campestris L．ssp．Chinensis Var．utilis Tssen．et Lee．)为材料，对影响ISSR-PCR扩增结果的因素如Mg^2＋、Taq DNA聚合酶、dNTPs、Primer、模版DNA的浓度及引物退火温度、延伸时间和循环次数进行了探讨，确立了适合菜心ISSR-PCR分析的最佳反应体系和PCR扩增参数：在25pL反应体系中含10×buffer 2．5μL，2．0mmol／LMg^2＋，0．5U Taq DNA聚合酶，0．2mmol／LdNTPs，0．5μmol／L引物，30ng模板DNA．PCR扩增程序：94℃预变性3min；94℃变性1min，49．7～56℃退火(退火温度随引物不同而定)1min，72℃延伸45s，40个循环；72℃延伸5min．。