RHO1基因的HIGS表达载体构建及转基因水稻的抗病性分析

编号 zgly0001641674

文献类型 期刊论文

文献题名 RHO1基因的HIGS表达载体构建及转基因水稻的抗病性分析

作者 唐喆  张强  项萍 

作者单位 西北农林科技大学植物保护学院 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2018年08期

年份 2018 

分类号 S435.11 

关键词 稻瘟菌  寄主诱导的基因沉默  水稻  抗病性  Gateway技术 

文摘内容 【目的】使用Gateway技术构建稻瘟菌RHO1基因寄主诱导的基因沉默(HIGS)表达载体,将其转化入水稻后,观察稻瘟菌对转基因水稻的致病力。【方法】利用PCR技术从稻瘟菌cDNA扩增RHO1基因,通过Gateway技术构建pBDL03-RHO1载体,电转化进入农杆菌AGL1;以水稻日本晴为材料,通过农杆菌介导的转化方法获得转基因水稻植株,并对其接种稻瘟菌,分析转基因水稻对稻瘟菌抗性。【结果】通过PCR扩增获得了RHO1基因片段,利用BP反应构建了入门载体pDONR 221-RHO1,采用LR反应构建了HIGS表达载体pBDL03-RHO1。通过农杆菌介导的转基因方法将HIGS载体转入了水稻中,并利用mCherry红色荧光观察和PCR扩增验证了转基因植株构建成功。接种试验结果表明,HIGS转基因植株对稻瘟菌的抗性提高。【结论】利用Gateway技术可以简单快速构建HIGS表达载体,表达RHO1的转基因水稻抗病性提高,表明RHO1介导的HIGS在水稻-稻瘟菌互作过程中可以发挥作用。