TILLING技术应用于家蚕化学诱导突变检测的体系优化

编号 zgly0001361477

文献类型 期刊论文

文献题名 TILLING技术应用于家蚕化学诱导突变检测的体系优化

作者 林英  陈冬妹  杨瑜  王艳霞  杨从文  夏庆友 

作者单位 西南大学生物技术学院蚕学与系统生物学研究所 

母体文献 蚕学通讯 

年卷期 2009年04期

年份 2009 

分类号 S882 

关键词 家蚕  TILLING  优化  功能基因组  点突变 

文摘内容 TILLING(Targeting Induced Local Lesions In Genomes)即定向诱导基因组局部突变技术,是近年发展起来的一种高通量检测点突变的反向遗传学方法。本研究从PCR模板量及酶切体系中CELI的酶量两个方面对家蚕TILLING技术的检测体系进行了优化。结果表明:本实验在应用TILLING技术筛选家蚕突变体过程中,用于PCR扩增的家蚕基因组DNA模板最佳用量为20ng;CELI酶切的20μL反应体系中,加入的最适酶量为0.5μL(本实验室从芹菜中自提的CELI酶10倍稀释液)。本研究初步对TILLING技术应用于家蚕化学诱导突变检测体系进行了优化,为TILLING技术在家蚕功能基因组研究中的应用奠定了基础。