球孢白僵菌羧基转运蛋白基因BbJEN1及其上游序列的克隆与分析

编号 zgly0000336074

文献类型 期刊论文

文献题名 球孢白僵菌羧基转运蛋白基因BbJEN1及其上游序列的克隆与分析

作者 张永军  方卫国  肖月华  金凯  裴炎 

作者单位 农业部生物技术与作物品质改良重点实验室西南农业大学生物技术研究中心重庆 

母体文献 微生物学报 

年卷期 2004,44(2)

页码 198-201

年份 2004 

分类号 Q949.32 

关键词 球孢白僵菌  羧基转运蛋白  基因  突变体  病原真菌  产孢机制 

文摘内容 在分析一株球孢白僵菌T-DNA插入突变体T12的Tagging序列的基础上, 根据与其具有高度同源性的一条金龟子绿僵菌EST序列(编号为AJ273226)设计简并引物, 用YADE法从球孢白僵菌中扩增出该: EST的同源序列及其延伸序列。序列分析表明, 该片段与粗糙脉孢霉的羧基转运蛋白.JEN1具有高度同源性, 由此确定该序列为球孢白僵菌羧基转运蛋白JENl基因的部分序列。然后利用YADE法延伸扩增该序列的上、下游序列, 获得球孢白僵菌羧基转运蛋白.IEN1的全长DNA序列, 命名为GBbJEN1。利用3’-RACE扩增出球孢白僵菌羧基转运蛋白JEN1的cDNA序列, 命名为BbJEN1。BbJEN1全长1656bp, 编码514个氨基酸的蛋白。推测蛋白分子量为55975.37Da, 等电点9.32。氨基酸序列与金龟子绿僵菌、粗糙脉孢霉和酿酒酵母羧基转运蛋白JEN1的同源性分别为77%、66%和30%。序列分析表明, GBbJEN1含有2个内含子。Southern杂交表明, GBbJEN1基因在球孢白僵菌基因组中为单拷贝。利用RT-PCR法对BbJEN1的表达特性进行了分析, 结果发现BbJEN1基因的转录受蟑螂壳、蝉蜕等昆虫体壁的诱导, 受葡萄糖的抑制。进一步利用YADE法获得了长为977bp的GBbJEN1上游序列, 其中含有可能的葡萄糖抑制调控序列和压力反应元件。