巨大芽孢杆菌细胞色素P450酶的表达纯化及定向进化研究

编号 zgly0000869428

文献类型 期刊论文

文献题名 巨大芽孢杆菌细胞色素P450酶的表达纯化及定向进化研究

作者 李迅  王婷  王亮亮  王飞 

作者单位 南京林业大学化学工程学院 

母体文献 林产化学与工业 

年卷期 2014(6)

页码 135-140

年份 2014 

关键词 巨大芽孢杆菌  细胞色素P450酶  定向进化  软脂酸  油酸 

文摘内容 为了获得高效的重组来自巨大芽孢杆菌ALA2的细胞色素P450酶(CYPs),将CYPs基因(cyp)克隆到大肠杆菌表达载体p ET20b(含T7启动子)和p Trc99A(含trc启动子)中,转入大肠杆菌表达,发现trc启动子更适合CYPs的表达。优化了Ni-NTA纯化CYPs的条件,在p H值8.1时,用60 mmol/L的咪唑缓冲液洗脱得到电泳纯的重组CYPs,酶活达到2 095 U/mg,纯化回收率为31%,回收倍数为2.32。