基于16S rDNA序列的Wolbachia的检测及分型

编号 zgly0001371042

文献类型 期刊论文

文献题名 基于16S rDNA序列的Wolbachia的检测及分型

作者 曲哲  丛斌  褚栋  董辉 

作者单位 沈阳农业大学植物保护学院  山东省农业科学院高新技术研究中心农业部黄淮海作物遗传改良与生物技术重点开放实验室 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2009年05期

年份 2009 

分类号 Q93 

关键词 Wolbachia  16S rDNA  PCR-RFLP  RFLP图谱  烟粉虱  米蛾 

文摘内容 Wolbachia是广泛分布于节肢动物体内的一类共生细菌。采用16S rDNA特异片段的PCR-RFLP方法对烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)不同生物型及米蛾Corcyra cephalonica(Stainton)共生菌Wolbachia进行了检测与分型分析。基于wsp基因对烟粉虱共生菌B组Wolbachia以及米蛾共生菌Wolbachia进行了系统树分析,并对相应的Wolbachia16S rDNA特异片段进行了克隆、测序以及序列比对。结果表明:16S rDNA的特异片段经NheⅠ酶切后RFLP图谱可有效检测与鉴别Wolbachia。烟粉虱共生菌Wolbachia的16S rDNA特异片段经VspⅠ酶切后可得到预期RFLP图谱,而米蛾共生菌B组Wolbachia(基于wsp序列分析为B组)则产生不同的RFLP图谱。序列分析表明,Nauru型烟粉虱体内B组Wolbachia的16S rDNA片段序列与已知B组Wolbachia对应序列(DQ278884)同源性为100%;米蛾体内B组Wolbachia16S rDNA特异片段有碱基变异,并存在于VspⅠ识别位点内,这是导致VspⅠ酶切后RFLP图谱不同的原因。结果提示,B组Wolbachia16S rDNA特异片段经VspⅠ酶切的RFLP图谱存在多态性。本研究结果可为今后Wolbachia的检测与分型提供借鉴。