Man5GlcNAc2哺乳动物甘露糖型糖蛋白的毕赤酵母表达系统构建

编号 zgly0000705439

文献类型 期刊论文

文献题名 Man5GlcNAc2哺乳动物甘露糖型糖蛋白的毕赤酵母表达系统构建

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 杨晓鹏  刘波  宋淼  巩新  唱韶红  薛奎晶  吴军 

作者单位 军事医学科学院生物工程研究所  沈阳药科大学生命科学与生物制药学院 

母体文献 生物工程学报 

年卷期 2011,27(1)

页码 108-117

年份 2011 

分类号 Q959.8 

关键词 α-1  2-甘露糖苷酶I  Man5GlcNAc2  糖基化  毕赤酵母  甘露糖型 

文摘内容 蛋白的糖基化对蛋白的活性、高级结构及功能都有重要的影响。酵母表达的糖蛋白不同于哺乳动物表达的杂合型或复杂型糖蛋白,而是高甘露糖型或过度甘露糖化糖蛋白。在前期成功敲除毕赤酵母α-1,6-甘露糖转移酶(Och1p)基因、阻断毕赤酵母过度糖基化,获得毕赤酵母过度糖基化缺陷菌株GJK01(ura3、och1)的基础上,通过表达不同物种来源的α-1,2-甘露糖苷酶I(MDSI)的活性区与酵母自身定位信号的融合蛋白,并通过DSA-FACE(基于DNA测序仪的荧光辅助糖电泳)分析筛选报告蛋白HSA/GM-CSF(人血清白蛋白与粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子融合蛋白)的糖基结构,发现当编码酿酒酵母α-1,2-甘露糖苷酶(MnsI)基因的内质网定位信号与带有完整C-端催化区的拟南芥MDSI基因融合表达时,毕赤酵母工程菌株能够合成Man5GlcNAc2哺乳动物甘露糖型糖蛋白。这为在酵母体内合成类似于哺乳动物杂合型或复杂型糖基化修饰的糖蛋白奠定了基础。