利用共聚焦扫描显微镜观察甜樱桃雌配子体的发育

编号 zgly0001474010

文献类型 期刊论文

文献题名 利用共聚焦扫描显微镜观察甜樱桃雌配子体的发育

作者 朱东姿  王甲威  宗晓娟  魏海蓉  刘庆忠 

作者单位 山东省果树研究所·山东省果树生物技术育种重点实验室 

母体文献 果树学报 

年卷期 2014年S1期

年份 2014 

分类号 S662.5 

关键词 甜樱桃  雌配子体  激光共聚焦扫描显微镜  延迟发育 

文摘内容 【目的】快速准确的观察甜樱桃雌配子体的发育过程。【方法】应用激光共聚焦扫描显微镜法(LSCM),对甜樱桃品种‘美早’和‘布鲁克斯’的雌配子体发育过程进行了观察。将甜樱桃胚囊用戊二醛固定,脱水透明后直接用激光扫描共聚焦显微镜观察,用488 nm激光激发后,细胞核和核仁有很强的自发荧光,细胞质液泡则没有自发荧光,因此根据胚囊内核的数量、位置、大小,液泡的有无、位置等可以很清楚地观察雌配子体的发育时期。【结果】利用这种新方法观察到的雌配子体发育过程与用石蜡切片法观察的一致,但是LSCM法更简便、省时、准确;依照拟南芥中雌配子体发生的划分方法,我们把甜樱桃的雌配子体发生过程划分为6个时期。利用激光共聚焦扫描显微镜法通过延迟胚囊的发育,对‘美早’和‘布鲁克斯’甜樱桃胚囊进行观察统计,结果发现开花当天的‘美早’中没有胚囊的胚珠和胚囊发生解体的胚珠占41%,而‘布鲁克斯’中仅为21%。当胚囊延迟发育3 d后,‘美早’中胚囊的解体率达45%,败育率高达66%;‘布鲁克斯’中有35.6%的胚囊发生解体,败育率是46.6%。【结论】由此推测,‘美早’胚囊容易败育且发育成熟后解体快,而‘布鲁克斯’的胚囊败育率低,活力高。