适用于生菜叶片蛋白质双向电泳方法的建立及初步应用

编号 zgly0000632293

文献类型 期刊论文

文献题名 适用于生菜叶片蛋白质双向电泳方法的建立及初步应用

作者 刘丽娟  舒烈波  陈海荣  罗利军 

作者单位 华中农业大学  上海市农业生物基因中心 

母体文献 植物遗传资源学报 

年卷期 2009,10(1)

页码 106-110

年份 2009 

分类号 Q510.3  S792.153 

关键词 生菜  叶片  蛋白质  双向电泳 

文摘内容 以生菜（Lactuca sativa）叶片为研究材料,参考拟南芥和水稻的双向电泳方法,分析了等点聚焦时间和染色方法等影响双向电泳的关键因素,建立适合生菜叶片总蛋白质分离的双向电泳方法：采用三氯乙酸-丙酮沉淀法进行总蛋白质提取,用24cm固相pH梯度等电聚焦8000V×8h结合12%的SDS-PAGE进行双向电泳分离,银染法和考马斯亮蓝染色法染色都获得了较好的结果。应用Image-Master-Elite软件对考马斯亮蓝染色法染色的图谱进行分析表明：每张凝胶上都检测到超过1000个的蛋白质,不同凝胶之间蛋白质的匹配律达到98%,具有较高的分辨率和重复性。初步分析了生菜叶片蛋白质的等电点、分子量的分布情况,发现生菜叶片蛋白质的等电点以5.0～5.5之间最多而分子量主要集中在20～60kD之间。