基于RNA复制子GHRH基因表达载体的构建及在293细胞中的表达

编号 zgly0000483700

文献类型 期刊论文

文献题名 基于RNA复制子GHRH基因表达载体的构建及在293细胞中的表达

作者 任晓慧  乔继光  刘松财  张明军  章倩倩  侯峰　  吕铁钢  周立光  吴琼  欧阳松应  张永亮 

作者单位 吉林大学畜牧兽医学院  河北农业大学海洋学院  深圳市肉品卫生检验所  中国协和医科大学  华南农业大学动物科学学院 

母体文献 畜牧兽医学报 

年卷期 2007,38(4)

页码 395-399

年份 2007 

分类号 Q789 

关键词 生长激素释放激素  塞姆利基森林病毒  复制子 

文摘内容 本研究将GHRH基因克隆到塞姆利基森林病毒(SFV)复制子质粒型表达载体pCMV-Rep-lacZ,构建了真核表达载体pCMV-Rep-GHRH。采用脂质体介导将表达质粒pCMV-Rep-GHRH转染293细胞,经RT-PCR、IFA、Tricine-SDS-PAGE和Western Blot检测,证明表达质粒pCMV-Rep-GHRH在293细胞中正确地表达了GH-RH多肽分子。本研究还利用放免法检测质粒载体转染细胞培养上清中GHRH浓度,初步比较了RNA复制子载体pCMV-Rep-GHRH和普通载体(pIRES-GHRH和pcDNA3-GHRH)的表达效率,结果表明,转染48 h,RNA复制子载体表达GHRH的含量显著高于普通载体,分别比pIRES-GHRH和pcDNA3-GHRH高出36.12%(P〈0.05)和67.94%(P〈0.05)。结论: 构建的真核表达载体pCMV-Rep-GHRH能够在真核细胞293中表达GHRH多肽分子,且表达水平显著高于普通载体,为下一步更好地调控动物生长以提高动物生产性能奠定基础。