显微注射构建烟粉虱的RNAi技术体系

编号 zgly0001486796

文献类型 期刊论文

文献题名 显微注射构建烟粉虱的RNAi技术体系

作者 李如美  王少丽  张友军 

作者单位 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 

母体文献 应用昆虫学报 

年卷期 2015年02期

年份 2015 

分类号 S433 

关键词 RNA干扰  显微注射  烟粉虱  dsRNA  实时荧光定量PCR 

文摘内容       RNAi已经成为揭示基因功能的一个常用的有力工具。在昆虫RNAi技术体系中,通过显微注射方法向昆虫体内注入dsRNA,实现系统性干扰,是最为广泛采用的方法。但对于体型较小的昆虫,注射法操作存在较大的难度,特别是非常微小的昆虫烟粉虱Bemisia tabaci。为了进行烟粉虱大规模基因功能验证,需要开发一套成熟的RNAi技术体系。本研究以烟粉虱的CYP6CM1基因为目标基因,通过显微注射法注射不同浓度的dsRNA到烟粉虱4龄若虫,荧光定量PCR检测其沉默效果。结果表明:在对单头烟粉虱注射50 n L时,注射不同浓度的dsRNA,对CYP6CM1基因的沉默效果不同,最大沉默效率可达到80%以上。因此,本实验成功构建了烟粉虱的RNAi技术体系,也可用于其它粉虱类害虫的RNAi技术。