绿色荧光蛋白标记荧光假单胞菌P303及其生存能力检测

编号 zgly0001304036

文献类型 期刊论文

文献题名 绿色荧光蛋白标记荧光假单胞菌P303及其生存能力检测

作者 张霞  张杰  李国勋  黄大昉  陈中义 

作者单位 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室  河北农业大学植物保护学院  中国农业科学院生物技术研究所  中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室 北京100094 河北农业大学植物保护学院  保定070001  北京100094  北京100081 

母体文献 植物保护学报 

年卷期 2005年03期

年份 2005 

分类号 S476 

关键词 荧光假单胞菌  绿色荧光蛋白  接合转移  Southern 杂交  定殖 

文摘内容 构建了含有荧光假单胞菌自身启动子 PP303的中间质粒载体 pGFP。然后利用 mini-Tn5转座子,通过接合转移,将两个带有不同启动子的绿色荧光蛋白基因分别整合到荧光假单胞菌 P303染色体上,获得了在488nm 波长下发光稳定的 P303m1和 P303m3菌株。PCR 鉴定和 Southern 印迹结果均证明绿色荧光蛋白已随机插入 P303染色体。SDS-PAGE 结果表明,含有 PA1/04/03启动子的P303m3菌株 GFP 表达量低于含有 PP303启动子的 P303m1菌株,染色体标记的 GFP 表达量低于质粒标记。室内平板抑菌试验结果表明,P303m1与出发菌株 P303抑菌活性相当,对九种植物病原真菌有较强的拮抗作用。定殖、生存竞争能力研究表明,荧光假单胞菌在自然土壤中和大白菜根际都具有较强的定殖能力。P303和 P303m1在自然土壤中第60天的菌量分别为1.63×104和3.3×102cfu/g 土（湿重）,大白菜根际第50天的菌量分别为3.29×106和4.1×104cfu/g 根（湿重）。