一种多酚类物质脱除杏仁过敏原测定实验方法

申请号 CN202011539372.3

专利名称 一种多酚类物质脱除杏仁过敏原测定实验方法

专利类型 发明 

年份 2021 

公开号 CN112630176A

公开日 2021.04.09

主分类号 G01N21/31

分类号 G01N21/31  G01N27/26  G01N27/447  G01N15/02 

申请日 2020.12.23

申请人 天津农学院 

国家省市 天津 

联系地址 300384 天津市西青区津静路22号 市辖区 天津市 CN 300384;300384 No. 22, Jing Jing Road, Xiqing District, Tianjin Municipal District Tianjin City CN 300384

发明人 张爱琳  杨薇  张华  梁筱研  迟越  苗颖 

代理人 涂琪顺

代理机构 北京化育知识产权代理有限公司 11833

优先权 CN202011539372(A) 20201223

内容摘要 本发明公开了一种多酚类物质脱除杏仁过敏原测定实验方法，包括如下步骤：准备材料；没食子酸标准曲线绘制；总酚的测定；SDS?PAGE电泳；纳米粒度和Zeta电位仪分析。在研究的各种果汁中，POM果汁显示出与杏仁蛋白形成复合物有更大的能力。纳米粒度和Zeta电位仪测定表明杏仁蛋白提取物粒径急剧增加至约3800nm，并且用POM汁处理后通过电泳分析到杏仁蛋白较少。这些观察结果支持多酚和杏仁蛋白之间形成复合物，这些复合物就可以通过过敏原沉淀防止杏仁过敏原对抗体的识别。

主权利要求 1.一种多酚类物质脱除杏仁过敏原测定实验方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1：准备材料：Folin-Ciocalteu试剂、没食子酸标准品、考马斯亮蓝染液、蛋白预染Marker、β-巯基乙醇、SDS-PAGE蛋白上样缓冲液、三羟甲基氨基甲烷、十二烷基硫酸钠SDS、甘氨酸、POM汁、BB汁、CG汁；步骤2：没食子酸标准曲线绘制准确移取没食子酸标准溶液(1000mg/L)2.5、5.0、10.0、15.0、20.0至50.0mL容量瓶中，分别配制成质量浓度为50、100、200、300、400mg/L的溶液，然后加入5.0mL质量浓度为40％的Folin-Ciocalteu试剂，反应8min后分别加入4.0mL7.5％Na 2 CO 3 溶液，再用去离子水定容至10ml，分别于30℃下反应1.0h，测定提取液在760nm处的吸光值；步骤3：总酚的测定使用Folin-Ciocalteu比色法测定POM汁、BB汁和CG汁的总酚量，并表示为每升毫克没食子酸当量，为制备样品，将稀释的500μLPOM汁、BB汁、CG汁和2.5mL稀释的Folin-Ciocalteu试剂在室温下混合8min，随后加入1.5mL的7.5％Na 2 CO 3 ，在暗处培育2小时后，使用紫外可见分光光度计测量样品在760nm处的吸光度；步骤4：SDS-PAGE电泳；步骤5：纳米粒度和Zeta电位仪分析。

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