申请号 CN202111087629.0
专利名称 用于提高枯草芽孢杆菌自发突变频率的质粒
专利类型 发明
年份 2021
公开号 CN113801888A
公开日 2021.12.17
主分类号 C12N15/75
分类号 C12N15/75 C12R1/125 C12N1/21 C12N15/90 C12N15/66
申请日 2021.09.16
申请人 南京农业大学
国家省市 江苏
联系地址 211225 江苏省南京市玄武区卫岗1号 南京市 江苏省 CN 211225;No.1 Weigang, Xuanwu District, Nanjing, Jiangsu, 211225 Nanjing City Jiangsu Province CN 211225
发明人 闫新 叶斌
代理人 傅婷婷;徐冬涛
代理机构 南京天华专利代理有限责任公司 32218
内容摘要 本发明公开了用于提高枯草芽孢杆菌自发突变频率的质粒。所述选自pUS20D9M,pUS20XP1以及pUS20XP2中的任意一个;其中,质粒pUS20D9M序列如SEQ ID NO.1所示,质粒pUS20XP1序列如SEQ ID NO.2所示,质粒pUS20XP2序列如SEQ ID NO.3所示。枯草杆菌是一种重要的微生物。很多育种工作需要提高枯草杆菌的基因突变频率。然而,目前尚缺乏理想的控制枯草杆菌自发突变频率的方法。本发明借助CRISPRi技术和过表达易错型DNA聚合酶的方法,提高宿主的自发突变频率(最高达5128倍)。整个操作可通过质粒的转化和消除实现,无需对宿主进行基因敲除。
主权利要求 1.用于提高枯草芽孢杆菌自发突变频率的质粒,其特征在于,选自pUS20D9M,pUS20XP1以及pUS20XP2中的任意一个;其中,质粒pUS20D9M序列如SEQ ID NO.1所示,质粒pUS20XP1序列如SEQ ID NO.2所示,质粒pUS20XP2序列如SEQ ID NO.3所示。
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