欧美杨107杨离体叶片体胚诱导的方法

申请号 CN202111249184.1

专利名称 欧美杨107杨离体叶片体胚诱导的方法

专利类型 发明 

年份 2021 

公开号 CN113748989A

公开日 2021.12.07

主分类号 A01H4/00

分类号 A01H4/00 

申请日 2021.10.26

申请人 山东省林业科学研究院 

国家省市 山东 

联系地址 250014 山东省济南市历下区文化东路42号 济南市 山东省 CN 250014;250014 No. 42, Wenhua East Road, Lixia District, Shandong, Ji'nan Jinan City A folk art form popular in Shandong CN 250014

发明人 李双云  乔艳辉  朱士利  李善文  韩友吉  张晓艳  董玉峰  姚俊修 

代理人 郑平

代理机构 济南圣达知识产权代理有限公司 37221

内容摘要 本发明属于植物生物技术领域，涉及欧美杨107杨离体叶片体胚诱导的方法，分别采用了胚状体再生途径、不定芽再生途径、解决欧美杨107杨再生率低下、出芽少的问题。其中，胚状体再生途径从叶片诱导到愈伤组织诱导出不定芽用时比不定芽再生途径要长20多天，诱导出来的芽的数量比不定芽再生途径少30多个，还不到不定芽再生途径诱导数量的一半。本发明中胚状体再生途径主要是为基因工程(基因转化、基因敲除等)、细胞悬浮培养做技术支持。不定芽再生途径主要用于提供脱毒种苗、进行快繁生产。使用本申请方法，愈伤诱导率、出芽率均在95％以上。

主权利要求 1.一种欧美杨107杨离体叶片体胚诱导的方法，其特征在于，包括：将秋季落叶后或春季萌芽前采集一年生枝条进行室内水培，萌发后，取刚刚展开的幼嫩叶片作为外植体；将所述幼嫩叶片进行消毒，切除叶片的边缘部分，在叶片主脉划几刀进行体外诱导培养，体外诱导培养基有如下浓度的原料组成：MS+2.0～2.5mg/L 2，4-D+0.1～0.15mg/L BA+0.1～0.15mg/L NAA+0.05～0.1mg/L TDZ+6.0～8.0g/L琼脂+30～35g/L蔗糖，pH值5.8～6.0；对上述培养后的叶片进行不定芽诱导培养，使愈伤组织出现绿色的芽点；将带芽点的愈伤组织进行茎段伸长培养，生根培养、炼苗移栽，即得。

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