申请号
CN202010397711.2
专利名称
一种“红花”五味子愈伤组织再生植株的方法
专利类型
发明
年份
2020
公开号
CN111387059A
公开日
2020.07.10
主分类号
A01H4/00
分类号
A01H4/00
申请日
2020.05.12
申请人
沈阳农业大学
国家省市
辽宁
联系地址
110866 辽宁省沈阳市东陵路120号
发明人
李宏博
李海燕
赵鑫
王彪
代理人
崔瑞迎
代理机构
西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙) 61223
内容摘要
本发明公开了一种“红花”五味子愈伤组织再生植株的方法,涉及植物组织培养技术领域,包括以下步骤:胚性愈伤组织的诱导、胚性愈伤组织的增殖与扩繁、胚的发生、胚的发育及植株再生、再生植株的移栽。本发明利用“红花”五味子的叶片作为愈伤组织再生植株为五味子优良种质繁殖奠定基础,有利于优良种质的保存,更好直接得到母体优良性状。
主权利要求
1.一种“红花”五味子愈伤组织再生植株的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1,胚性愈伤组织的诱导,选用“红花”五味子的无菌苗叶片接种于1号培养基,培养28-32天后转移至新的1号培养基中继续培养28-32,然后切除黄褐色坚硬部分后,再转移至新的1号培养基继续培养28-32天,获得胚性愈伤组织;所述1号培养基以MS培养基为基础,添加有浓度为0.2-3.0mg/L的2,4-D和浓度为0.1-0.2mg/L的TDZ;S2,胚性愈伤组织的增殖与扩繁,将S1中获得的所述胚性愈伤组织接种到2号培养基中培养28-32天,获得后期胚性愈伤组织;所述2号培养基以MS培养基为基础,添加有浓度为0.1-02mg/L的2,4-D和浓度为0.1-0.2mg/L的TDZ;S3,胚的发生,将S2中获得的后期胚性愈伤组织切成0.4-0.6cm 3 的团块接种到3号培养基中培养28-32天,获得胚状体;所述3号培养基以MS培养基为基础,添加有浓度为0.2-0.5mg/L的ABA;S4,胚的发育及植株再生,将S3中获得的胚状体接种到MS培养基中进行胚发育,28-32天后获得子叶形胚和长出胚根的胚,将所述子叶形胚和长出胚根的胚接种至新的MS培养基中继续培养28-30天,形成幼苗;S5,再生植株的移栽,待S4中获得的幼苗形成完整植株后炼苗2-4天,从瓶中取出完整植株,洗净根部的培养基,将其移栽到混合的无菌沙子和泥土中。
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