草地贪夜蛾对苏云金芽孢杆菌Bt Cry1F毒素抗性基因的分子检测方法

申请号 CN202010112224.7

专利名称 草地贪夜蛾对苏云金芽孢杆菌Bt Cry1F毒素抗性基因的分子检测方法

专利类型 发明 

年份 2021 

公开号 CN113293215A

公开日 2021.08.24

主分类号 C12Q1/6888

分类号 C12N15/11  C12Q1/6888  C12N15/12 

申请日 2020.02.24

申请人 南京农业大学 

国家省市 江苏 

联系地址 211225 江苏省南京市溧水区白马镇国家农业科技园南京农业大学基地

发明人 吴益东  王兴亮  管放  杨亦桦  武淑文 

代理人 傅婷婷;徐冬涛

代理机构 南京天华专利代理有限责任公司 32218

优先权 CN202010112224(A) 20200224

内容摘要 本发明公开了草地贪夜蛾对苏云金芽孢杆菌Bt Cry1F毒素抗性基因的分子检测方法。该方法利用SEQ ID NO.1所示的特异性正向引物F和SEQ ID NO.2所示的特异性反向引物R对草地贪夜蛾基因组DNA模板进行PCR扩增，对PCR纯化产物直接测序，根据测序色谱图鉴定草地贪夜蛾个体腺苷三磷酸(ATP)结合盒转运蛋白C2基因第15号外显子是否发生了12?bp的碱基插入，且一次性区分出所述抗性基因的敏感纯合子、抗性杂合子和抗性纯合子。该方法具有快速简便、准确性高的优点，专用于草地贪夜蛾对Bt Cry1F毒素抗性的分子检测和早期预警。

主权利要求 1.一种草地贪夜蛾对苏云金芽孢杆菌Bt Cry1F毒素抗性基因的分子检测方法，所述的抗性基因为草地贪夜蛾腺苷三磷酸结合盒转运蛋白C2基因，该基因野生型序列的GenBank数据库登录号KY489760.1,其特征在于利用SEQ ID NO.1所示的特异性正向引物F和SEQ IDNO.2所示的特异性反向引物R对草地贪夜蛾基因组DNA模板进行PCR扩增，对PCR纯化产物直接测序，根据测序色谱图鉴定草地贪夜蛾样本ABCC2基因第15号外显子的核苷酸是否发生12-bp插入，一次性区分出所述ABCC2基因抗性靶标的

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