正交设计优化草地早熟禾SRAP-PCR反应体系及引物筛选

编号 zgly0001619015

文献类型 期刊论文

文献题名 正交设计优化草地早熟禾SRAP-PCR反应体系及引物筛选

作者 任小巍  王瑜  袁庆华 

作者单位 兰州大学草地农业科技学院  中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 

母体文献 草业科学 

年卷期 2012年03期

年份 2012 

分类号 S688.4 

关键词 草地早熟禾  SRAP标记  正交试验设计  引物筛选 

文摘内容 采用L9(34)正交试验设计方法,对草地早熟禾(Poa pratensis)基因组DNA SRAP-PCR反应体系中的TaqDNA聚合酶、Mg2+、引物及dNTP四因素的用量进行优化,并比较不同模板DNA用量对扩增的影响,建立草地早熟禾SRAP-PCR最佳反应体系,同时,利用该体系对SRAP引物进行筛选。结果表明,草地早熟禾SRAP-PCR最佳反应体系为Taq DNA聚合酶1.0U、Mg2+1.75mmol.L-1、引物0.25μmol.L-1、dNTP 220μmol.L-1、40ng模板DNA、2μL 10×PCR buffer,总体积20μL。运用该体系从100对SRAP引物中筛选出43对引物能够产生清晰稳定的扩增条带且多态性丰富。优化体系的建立及引物的筛选可为今后利用SRAP标记技术对草地早熟禾进行遗传多样性分析、图谱构建、种质资源鉴定奠定技术基础。