鸡白细胞中抗菌肽的分离纯化及活性鉴定方法的建立

编号 zgly0000556544

文献类型 期刊论文

文献题名 鸡白细胞中抗菌肽的分离纯化及活性鉴定方法的建立

作者 齐珂珂  康相涛  李国喜  孙桂荣  田亚东  韩瑞丽 

作者单位 河南农业大学牧医工程学院  中国农业科学院北京畜牧兽医研究所  河南家禽种质资源创新研究工程中心 

母体文献 西北农林科技大学学报 

年卷期 2008,36(9)

页码 27-32,39

年份 2008 

分类号 Q516 

关键词 鸡白细胞  抗菌肽  纯化  活性检测 

文摘内容 【目的】建立鸡白细胞中抗菌肽的分离纯化及活性鉴定方法。【方法】通过腹腔注射酪蛋白生理盐水，从鸡人工腹水中得到白细胞；将收集的白细胞，通过超声波反复破碎、体积分数10％乙酸浸提、低温高速离心、旋转蒸发除去乙酸和冷冻干燥等方法，得到抗菌肽粗提物；将得到的粗提物，经CM-Sepharose Fast Flow弱酸性阳离子交换层析和反相高效液相色谱(RP-HPLC)纯化，收集分离的各组分，使用微量琼脂糖弥散法检测各组分的抗菌活性和最小抑菌浓度。【结果】共获得鸡抗菌肽粗提物0．270g，经RP-HPLC分离纯化，抗菌肽离子交换阳性组分共分离出18个峰，其中6个峰对3种细菌均表现较强的抑菌活性，对鸡大肠杆菌E．coliO78(峰13)、金黄色葡萄球菌S．au-reus 1056MRSA(峰15)和白色念珠菌C．albicans ATCC10231(峰15)的最小抑菌浓度分别为0．627，0．001和0．035μg／mL。【结论】该法可以在实验室中用于鸡抗菌肽的提取及活性鉴定。