培养液充气时间对小鼠4细胞胚胎密闭培养效果的影响

编号 zgly0001727541

文献类型 期刊论文

文献题名 培养液充气时间对小鼠4细胞胚胎密闭培养效果的影响

作者 刘洁  王丹丹  陈芳  谷建锋  王兆  赵晓娥  马保华 

作者单位 西北农林科技大学动物医学院 

母体文献 西北农林科技大学学报:自然科学版 

年卷期 2021,49(5)

页码 1-7

年份 2021 

分类号 Q813.7 

关键词 氧自由基  缺氧诱导因子-1α  密闭培养  小鼠胚胎 

文摘内容 【目的】研究标准气充气时间对密闭培养的小鼠4细胞胚胎体外发育的影响,为太空环境下哺乳动物的早期胚胎发育研究奠定基础。【方法】用气体组成为体积分数5%O 2、5%CO 2、90%N 2的高纯标准气对胚胎培养液进行充气处理,充气时间设为30,60,90,120,150,180和240 min,用充气培养液对小鼠4细胞胚胎进行密闭培养,以常规体外微滴培养的胚胎为对照,分别在培养12,36,60,84 h时检测各组体外培养胚胎过氧化物的积累情况和缺氧诱导因子(HIF-1α)表达的变化,并于培养84 h统计囊胚发育率、孵化率和囊胚总细胞数。【结果】当充气时间≥180 min时,胚胎发育早期存在明显的过氧化物积累现象;当充气时间≤120 min时,胚胎发育过程中可以检测到HIF-1α,表明出现缺氧现象。密闭培养条件下,培养液充气120~180 min时的小鼠胚胎囊胚发育率、孵化率和囊胚总细胞数较高,分别为93.38%~95.68%,61.03%~65.27%和102.33~111.83,其中囊胚发育率和囊胚总细胞数与对照组差异不显著(P》0.05),而囊胚孵化率显著高于对照组(P《0.05)。【结论】小鼠4细胞胚胎密闭培养体系适合的培养液充气方案为:用气体组成比例为体积分数5%O 2、5%CO 2、90%N 2的高纯标准气充气120~150 min,此方案下进行密闭培养的小鼠胚胎可获得较高的发育率,并可有效排除缺氧对早期胚胎体外发育的影响,同时保护胚胎免受过氧损伤。